移液器專題匯總
目前,移液器已廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室、藥學(xué)和化學(xué)實(shí)驗(yàn)室、環(huán)境實(shí)驗(yàn)室等等。下面將為您詳細(xì)介紹移液器的相關(guān)信息:
八、移液器標(biāo)稱容量與測量結(jié)果誤差允許標(biāo)準(zhǔn)
1.氣墊式(內(nèi)置)活塞移液器
2. 外置式活塞移液器
二、移液器的工作原理 TOP↑
活塞通過彈簧的伸縮運(yùn)動(dòng)來實(shí)現(xiàn)吸液和放液。在活塞推動(dòng)下,排出部分空氣,利用大氣壓吸入液體,再由活塞推動(dòng)空氣排出液體。使用移液器時(shí),配合彈簧的伸縮性特點(diǎn)來操作,可以很好地控制移液的速度和力度。
三、移液器知名品牌 TOP↑
1. 艾本德(Eppendorf)移液器:作為移液器的發(fā)明者,艾本德在移液器市場近幾年無論是在全球還是國內(nèi),都穩(wěn)居。
2. 吉爾森(GILSON)移液器:吉爾森的移液器都是不銹鋼活塞,其Pipetman系列移液器自上市以來,享譽(yù)數(shù)十年,以結(jié)實(shí)[accurate]著稱;但人體工程學(xué)元素很少,非常笨重,力氣小的人如果長時(shí)間使用頗有些痛苦。
3. 芬蘭雷勃(Finnpipette)移液器:雷勃現(xiàn)在是美國熱電(Thermo Fisher)的子公司。其彩槍和白槍都是在中國生產(chǎn)的,采用塑料活塞,品質(zhì)一般,但價(jià)格低廉,在中國市場的接受度非常高,與大龍一起是高校學(xué)生用的[much]多的產(chǎn)品。另外,其多道移液器性價(jià)比比較高,在中國市場接受度也很高。
4. 芬蘭百得(BIOHIT)移液器:百得在歐洲也算得上是高檔產(chǎn)品,但在中國卻一直都沒能體現(xiàn)其高貴的血統(tǒng)。其Proline系列上市已久,性能中庸,現(xiàn)在在國內(nèi)生產(chǎn),也是眾多國內(nèi)品牌的仿制對(duì)象。
5.德國普蘭德(BRAND)移液器:普蘭德在國內(nèi)成名已久,但一直沒有大作為——這可能與其區(qū)域代理的銷售模式和非主流的產(chǎn)品特點(diǎn)有很大關(guān)系。普蘭德的移液器用玻璃作為活塞的材質(zhì),其Transferpipette系列(灰槍和白槍),外形非常獨(dú)特,但現(xiàn)在已逐漸退出市場。現(xiàn)在普蘭德主推的是其整支滅菌的Transferpipette S系列,性價(jià)比有所提高,但外形則中規(guī)中矩,缺乏特色了。
四、移液器選購指南 TOP↑
1.了解移液器性能
即移液器的[accuracy]性和重復(fù)性對(duì)于絕大多數(shù)用戶而言,購買之前檢測產(chǎn)品性能既有難度又無必要。因此,主要還是依據(jù)制造廠商提供的技術(shù)數(shù)據(jù)。但在這里還是要說明兩點(diǎn):其一,不要輕易相信賣家的口頭承諾,一定要查閱制造商提供的書面材料;其二,在全球移液器市場上影響較大的品牌,其提供的技術(shù)數(shù)據(jù)可信度更高。
2.了解移液器的可靠耐用度
主要取決于移液器所用的材料。對(duì)于外殼,應(yīng)當(dāng)有較高的耐沖擊性、耐腐蝕性和較低的導(dǎo)熱性(如PVDF材質(zhì));對(duì)于活塞,目前市場上主要有不銹鋼、陶瓷和塑料三種材質(zhì)。不銹鋼機(jī)械性能好、壽命長,只是不太適合用于強(qiáng)酸強(qiáng)堿的移液;陶瓷則有很高的耐腐蝕性,但機(jī)械性能較差。當(dāng)然,優(yōu)質(zhì)的材料往往意味著更高的價(jià)格,所以需要綜合考慮購買價(jià)格和壽命的因素。
3.了解移液器人體工程學(xué)設(shè)計(jì)
主要可考慮以下幾點(diǎn): ,完成一個(gè)移液循環(huán)拇指的移動(dòng)距離短,意味著舒適度更高; 第二,比較相同量程的移液器完成一次排液(一定要按到底)所需的拇指用力,這是影響舒適性的關(guān)鍵,用力越少意味著長期使用造成手指損傷的風(fēng)險(xiǎn)越小;第三,裝卸吸頭,同樣是越省力越好; 第四,移液器的重量適中,過重會(huì)增加手的負(fù)擔(dān),但過輕也往往意味著材質(zhì)可能差強(qiáng)人意; 第五,其它的輔助設(shè)計(jì),如殼體的磨砂設(shè)計(jì)以及指鉤設(shè)計(jì),有助于進(jìn)一步提高舒適性。SOCOREX在人體工程學(xué)方面,在全球移液器市場都處于力爭上游的位置,在以上幾點(diǎn)都有flawless的表現(xiàn)。
1.移液器量程的調(diào)節(jié):在調(diào)節(jié)量程時(shí),如果要從大體積調(diào)為小體積,則按照正常的調(diào)節(jié)方法,逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可;但如果要從小體積調(diào)為大體積時(shí),則可先順時(shí)針旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,這樣可以保證量取的[tallest[accurate度。在該過程中,千萬不要將按鈕旋出量程,否則會(huì)卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞了移液槍。
2.移液器槍頭(吸液嘴)的裝配:在將槍頭(pipettetips)套上移液槍時(shí),很多人會(huì)使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這是錯(cuò)誤的做法,因?yàn)檫@樣會(huì)導(dǎo)致移液槍的內(nèi)部配件(如彈簧)因敲擊產(chǎn)生的瞬時(shí)撞擊力而變得松散,甚至?xí)?dǎo)致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住。正確的方法是將移液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)即可使其緊密結(jié)合。
如果是多道(如8道或12道)移液槍,則可以將移液槍的對(duì)準(zhǔn)槍頭,然后傾斜地插入,往前后方向搖動(dòng)即可卡緊。槍頭卡緊的標(biāo)志是略為超過O型環(huán),并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。
3.移液的方法:移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時(shí),移液器保持豎直狀態(tài),將槍頭插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時(shí))。這時(shí)可以采取兩種移液方法:
一是前進(jìn)移液法。用大拇指將按鈕按下至停點(diǎn),然后慢慢松開按鈕回原點(diǎn)。接著將按鈕按至停點(diǎn)排出液體,稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點(diǎn)吹出殘余的液體。[much]后松開按鈕。二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體,其原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體,轉(zhuǎn)移液體的時(shí)候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點(diǎn),慢慢松開按鈕至原點(diǎn)。接著將按鈕按至停點(diǎn)排出設(shè)置好量程的液體,繼續(xù)保持按住按鈕位于停點(diǎn)(千萬別再往下按),取下有殘留液體的槍頭,棄之。
使用步驟:
1.當(dāng)移液器吸嘴有液體時(shí)切勿將移液器水平或倒置放置,以防液體流入活塞室腐蝕移液器活塞。
2.正確使用移液器吸液、排液,以達(dá)高[accurate]度。
3.平時(shí)檢查是否漏液的方法:
a.吸液后在液體中停 1-3
b.秒觀察吸頭內(nèi)液面是否下降;如果液面下降首先檢查吸頭是否有問題,如有問題更換吸頭,更換吸頭后液面仍下降說明活塞組件有問題,應(yīng)找專業(yè)維修人員修理。
4.需要高溫消毒的移液器應(yīng)首先查閱所使用的移液器是否適合高溫消毒后再行處理。
5.使用完后,可以將其豎直掛在移液槍架上,但要小心別掉下來。當(dāng)移液器槍頭里有液體時(shí),切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
1.如液體不小心進(jìn)入活塞室應(yīng)及時(shí)清除污染物。
2.移液器使用完畢后,把移液器量程調(diào)至髙至值,且將移液器垂直放置在移液器架上。
3.根據(jù)使用頻率所有的移液器應(yīng)定期用肥皂水清洗或用 60 %的異丙醇消毒,再用雙蒸水清洗并晾干。
4.避免放在溫度較高處以防變形致漏液或不準(zhǔn)。
八、移液器標(biāo)稱容量與測量結(jié)果誤差允許標(biāo)準(zhǔn) TOP↑
1.“標(biāo)稱量程”其實(shí)是一個(gè)完全錯(cuò)誤的講法,因?yàn)樗^的“量程”應(yīng)該是一個(gè)范圍內(nèi)的事情,而在移液器的相關(guān)規(guī)程或標(biāo)準(zhǔn)中,并沒有“標(biāo)稱量程”這種提及。我們注意到,在移液器相關(guān)的計(jì)算中,常常使用的一個(gè)詞是“標(biāo)稱容量”,其定義是一定量程范圍內(nèi)的髙至量程即稱之為“標(biāo)稱容量”。因此,根據(jù)該定義的描述,可知,所謂的“標(biāo)稱容量”其實(shí)是一個(gè)容量“點(diǎn)”,而非一段容量“范圍”,因此,使用“標(biāo)稱容量”的說法來代替“標(biāo)稱量程”的說法,想染更為貼切。以上我們所討論的是對(duì)具有一定量程范圍的移液器的“標(biāo)稱容量”定義,那么,對(duì)于沒有一定容量范圍的移液器,也就是固定容量的移液器,其標(biāo)稱容量是什么呢?很顯然,如果是固定容量的移液器,其標(biāo)稱容量及時(shí)其固定容量。我們列舉兩個(gè)簡單的例子以求更為明了。如可變量程范圍是0.1-3ul的移液器,其標(biāo)稱容量是3ul;如國定容量100ml的移液器,其標(biāo)稱容量是100ml。
2.對(duì)于可變量程移液器的測量結(jié)果,其誤差的要求如何呢?這里,就要應(yīng)用到“標(biāo)稱容量”這個(gè)詞。標(biāo)稱容量的定義前面已經(jīng)提到,因此,對(duì)一支可變量程的移液器,則選擇其有效量程范圍內(nèi)的髙至量程作為其標(biāo)稱容量。注意,這里我們說的是“有效”量程,所謂有效量程既是移液器的生產(chǎn)商所宣稱的量程。因?yàn)?,現(xiàn)在市場上銷售的多種移液器,其容量可調(diào)節(jié)的范圍,往往都要超出其生產(chǎn)商宣稱的范圍。如10-100ul的移液器,其有效量程是10-100ul,但實(shí)際上,其低至值可以調(diào)節(jié)到7ul左右,髙至值也可以調(diào)節(jié)到110ul左右,但這個(gè)范圍7-110ul并不是廠家所宣稱的該只移液器的量程,不是該只移液器的有效量程。因此,該只移液器的標(biāo)稱容量是100ul,而不是110ul。
對(duì)可變量程移液器測量結(jié)果的誤差標(biāo)準(zhǔn),是以其標(biāo)稱容量來對(duì)比上述表1或表2來知道其誤差范圍的。如10-100ul的A型移液器,對(duì)比表1,同時(shí)因其標(biāo)稱容量是100ul,查表1可知,其測量結(jié)果的髙至系統(tǒng)允差是+/-0.8、髙至隨機(jī)誤差是+/-0.3。
1.整支可消毒移液器
可顯示4位數(shù)字;整支移液器可高溫高壓消毒;具有獨(dú)特的單操縱桿結(jié)構(gòu);設(shè)計(jì)有容量調(diào)節(jié)旋鈕安全鎖,避免移液過程體積發(fā)生變化;下端細(xì)長,便于從窄長容器中移取液體;小量程(小于100~d)移液器為金屬活塞;大量程(大于100g1)移液器為夾芯陶瓷活塞,耐磨、抗腐蝕;可根據(jù)按鈕顏色選擇適配標(biāo)準(zhǔn)吸嘴;可進(jìn)行三點(diǎn)校正。
2.半支可消毒移液器
移液器上下端可拆離,下端部分可高溫高壓消毒;外殼采用新型抗UV材料;多道可調(diào)移液器,分為八道和十二道兩類;尖端的橡膠環(huán)能確保緊密結(jié)合。
3.電動(dòng)移液器
具有三種操作模式(PIP、DIS、FIX);液晶數(shù)字可顯示吸取液量、連續(xù)加樣次數(shù)和加樣速度等多項(xiàng)指標(biāo);馬達(dá)驅(qū)動(dòng)加樣,可充電;具有分配功能,[much]多可進(jìn)行20次分配;可直接改變?nèi)∫毫?,方便快捷;可直接測出余液量;可進(jìn)行編程。
4.PCR專用移液器
主要用于PCR等精密實(shí)驗(yàn);具有特殊的活塞吸嘴,確保無交叉污染;非空氣活塞推動(dòng)原理,手接觸溫度、液體的黏滯度等因素不會(huì)影響其[accurate度;具有獨(dú)特的單操縱桿結(jié)構(gòu);可實(shí)行五點(diǎn)校正。
1.微量移液器的安裝步驟:
1)把活塞和彈簧裝入移液器下半部。
2)把活塞固定器放在活塞上面,并把它按進(jìn)下半部分的溝槽。
3)把下半部旋緊到上半部手柄(不要使用小工具)。
4)按下脫卸按鈕,裝上脫卸筒套。
2.微量移液器的拆卸步驟:
1)往下按緊脫卸按鈕,用力拉出脫卸套筒??墒褂秒S移液器提供的小工具對(duì)下半支進(jìn)行拆卸。
2)向左旋轉(zhuǎn)下半支移液器,使其脫離把手。
3)按活塞固定器并移走(活塞有可能受彈簧彈力作用彈出)。
4)卸下活塞和彈簧。
單道移液器拆卸方法:
多道移液器拆卸方法:
1)按到檔,垂直進(jìn)入液面幾毫米。
2).緩慢松開控制按鈕,否則液體進(jìn)入吸頭過速會(huì)導(dǎo)致液體倒吸人移液器內(nèi)部吸人體積減少。
3)打出液體時(shí)貼壁并有一定角度,先按到檔,稍微停頓1s后,待剩余液體聚集后,再按到第二檔將剩余液體全部壓出。
黏稠或易揮發(fā)液體的移取
在移取黏稠或易揮發(fā)的液體時(shí),很容易導(dǎo)致體積誤差較大。為了提高移液[accuracy]性,建議采取以下方法:
1)移液前先用液體預(yù)濕吸頭內(nèi)部,即反復(fù)吸打液體幾次使吸頭預(yù)濕,吸液或排出液體時(shí)理想地多停留幾秒。尤其對(duì)于移取體積大的液體(如1000~1),建議將吸頭預(yù)濕后再移取。
2)采用反相移液法:吸液時(shí)按到檔,慢慢松開控制按鈕,打液時(shí)按到第二檔即可,部分液體殘留在吸頭內(nèi)。
常見的錯(cuò)誤操作
1)吸液時(shí),移液器本身傾斜,導(dǎo)致移液不[accuracy](應(yīng)該垂直吸液,慢吸慢放)。
2)裝配吸頭時(shí),用力過猛,導(dǎo)致吸頭難以脫卸(無需用力過猛,選擇與移液器匹配的吸頭)。
3)平放帶有殘余液體吸頭的移液器(應(yīng)將移液器掛在移液器架上)。
4)用大量程的移液器移取小體積樣品(應(yīng)該選擇合適量程范圍的移液器)。
5)直接按到第二檔吸液(應(yīng)該按照上述標(biāo)準(zhǔn)方法操作)。
6)使用丙酮或強(qiáng)腐蝕性的液體清洗移液器(應(yīng)該參照正確清洗方法操作)。
1.校準(zhǔn)的基本操作條件
操作室:獨(dú)立房間,顯示溫度和濕度狀態(tài)。
溫度控制:15—30~C(±0.5℃)。
濕度控制:60%~90%。
工作臺(tái)面:防震、防塵、遠(yuǎn)離熱源、無陽光直射。
天平:0.000 01g精密分析天平(小數(shù)點(diǎn)后5位),每年需由廠家進(jìn)行校準(zhǔn)。
防蒸發(fā)裝置:Eppendorf提供的濕度阱,防止稱量液體的揮發(fā)。
測試介質(zhì):雙蒸水,每4h更換一次,批次更換周期不大于2周。
2.操作步驟
1)同溫化處理:校正前,所有移液器及校正介質(zhì)(工作臺(tái)、天平、雙蒸水等)置于相同操作間4h,以確保它們具有相同的溫度。
2)內(nèi)外部清洗。
3)潤滑活塞。
4)校準(zhǔn):采用三點(diǎn)校準(zhǔn)法,即根據(jù)移液器量程范圍,選取低達(dá)量程、中間值和[tallest量程三點(diǎn)分別測試10次,各個(gè)測試點(diǎn)取其平均值,計(jì)算其[accuracy]度(accuracy)和[accurate度(precision),評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)符合DIN 12650要求。
5)校準(zhǔn)報(bào)告:可根據(jù)客戶需求提供計(jì)算機(jī)打印的標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告或PICASO校正報(bào)告,符合ISO、DIN或ASTM相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。
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